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抗病毒涂料檢測(cè)方法步驟有哪些
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  • 2025-09-29

　　抗病毒涂料的核心應(yīng)用場(chǎng)景是病毒接觸傳播的高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域，通過(guò)檢測(cè)確保涂料的抗病毒功能真實(shí)有效，可使涂層表面成為“被動(dòng)防疫屏障”，輔助減少病毒在物體表面的存活時(shí)間與數(shù)量，為公共衛(wèi)生防控體系提供補(bǔ)充支持，降低人員因接觸污染表面而感染病毒的概率?？共《就苛蠙z測(cè)有哪些方法？


抗病毒涂料檢測(cè)


　　抗病毒涂料檢測(cè)方法步驟


　　1.病毒接種與作用


　　取樣與滴加：用無(wú)菌移液器取0.1mL病毒懸液，均勻涂布于固化后的涂層表面，確保病毒液覆蓋載體整個(gè)有效區(qū)域（避免邊緣流失）；


　　作用計(jì)時(shí)：立即開(kāi)始計(jì)時(shí)，在標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下靜置2h；


　　對(duì)照設(shè)置：同步設(shè)置3組對(duì)照試驗(yàn)，確保結(jié)果有效性：


　　空白載體對(duì)照：將病毒懸液滴加至未涂覆涂料的空白滅菌載體，同條件作用2h；


　　病毒陽(yáng)性對(duì)照：僅培養(yǎng)病毒懸液，不接觸任何載體，驗(yàn)證病毒本身活性；


　　中和劑對(duì)照：將中和劑與病毒懸液混合，確認(rèn)中和劑無(wú)病毒抑制作用。


　　2.病毒洗脫與中和


　　洗脫操作：作用時(shí)間結(jié)束后，立即將載體放入含10mL中和劑的無(wú)菌離心管中，置于搖床（150rpm）振蕩10min，確保涂層表面的病毒完全洗脫至中和劑中；


　　中和反應(yīng)：振蕩后靜置5min，讓中和劑充分終止涂料中抗病毒成分的作用，得到病毒洗脫液。


　　3.病毒滴度檢測(cè)（細(xì)胞培養(yǎng)法）


　　梯度稀釋?zhuān)簩⒉《鞠疵撘河眉?xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行10倍系列稀釋?zhuān)◤?0?1至10??），每個(gè)稀釋度設(shè)置3個(gè)重復(fù)孔；


　　細(xì)胞接種：在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔加入100μL稀釋后的病毒洗脫液，再加入100μL對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的敏感細(xì)胞（細(xì)胞濃度約1×10?cells/mL）；


　　培養(yǎng)觀察：將培養(yǎng)板置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天觀察細(xì)胞病變（CPE）情況，連續(xù)觀察3-5d，記錄每個(gè)稀釋度出現(xiàn)細(xì)胞病變的孔數(shù)；


　　滴度計(jì)算：采用Reed-Muench法計(jì)算病毒滴度（TCID??/mL），即能引起50%細(xì)胞出現(xiàn)病變的病毒稀釋度對(duì)應(yīng)的滴度。


　　4.抗病毒率計(jì)算


　　公式：抗病毒率（%）=[1-（試驗(yàn)組病毒滴度/空白載體對(duì)照組病毒滴度）]×100%；


　　判定：若抗病毒率≥99%（即病毒滴度下降≥2lgTCID??），且兩類(lèi)病毒均滿(mǎn)足該要求，則判定抗病毒性能合格。


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