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　　在光催化材料抗病毒性能檢測(cè)中，Q-β噬菌體法因操作安全性高、重復(fù)性好、檢測(cè)周期短等優(yōu)勢(shì)，成為GB/T42349-2023《光催化材料抗病毒活性測(cè)定》推薦的核心方法之一，廣泛應(yīng)用于建材、空氣凈化、醫(yī)療防護(hù)等領(lǐng)域的光催化產(chǎn)品檢測(cè)。該方法以Q-β噬菌體為模型病毒，通過(guò)模擬實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景中的光照條件，精準(zhǔn)測(cè)定光催化材料對(duì)病毒的滅活效率。

　　光催化材料抗病毒檢測(cè)Q-β噬菌體法解讀

　　Q-β噬菌體是一種特異性感染大腸桿菌的RNA噬菌體，其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、無(wú)致病性，且對(duì)光催化反應(yīng)產(chǎn)生的羥基自由基等活性物質(zhì)敏感，能客觀反映光催化材料的抗病毒能力。光催化材料抗病毒檢測(cè)Q-β噬菌體法的核心原理的是：在特定光照條件下，光催化材料產(chǎn)生的活性氧物種破壞Q-β噬菌體的核酸與蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致其失去感染能力，通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)前后噬菌體的存活數(shù)量，計(jì)算滅活率，進(jìn)而判定材料的抗病毒性能。

　　該方法適用于各類光催化材料及制品，包括光催化涂料、光催化濾網(wǎng)、光催化陶瓷、光催化薄膜等，尤其適合需要快速完成檢測(cè)、對(duì)生物安全等級(jí)要求較高的場(chǎng)景。

　　光催化材料抗病毒檢測(cè)Q-β噬菌體法實(shí)操步驟

　　1：樣品分組與反應(yīng)體系搭建

　　設(shè)立實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組：每組設(shè)置3個(gè)平行樣，確保數(shù)據(jù)可靠性；

　　實(shí)驗(yàn)組：取無(wú)菌培養(yǎng)皿，放入1塊光催化材料樣品，加入0.5mLQ-β噬菌體懸液，再加入0.5mLPBS緩沖液，輕輕搖勻，使噬菌體懸液均勻覆蓋樣品表面；

　　對(duì)照組：實(shí)驗(yàn)條件與實(shí)驗(yàn)組一致，但不加光催化材料，僅加入0.5mL噬菌體懸液+0.5mLPBS緩沖液，用于排除光照本身對(duì)噬菌體的影響。

　　2：光照反應(yīng)與取樣

　　將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組置于預(yù)設(shè)的光照設(shè)備下，調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度（如3mW/cm2），開(kāi)始計(jì)時(shí)，反應(yīng)時(shí)間按GB/T42349-2023要求設(shè)定為2小時(shí)（或根據(jù)材料特性調(diào)整，但需在報(bào)告中注明）；

　　反應(yīng)過(guò)程中，每30分鐘輕輕搖晃培養(yǎng)皿1次，確保噬菌體與光催化材料充分接觸；

　　反應(yīng)結(jié)束后，立即將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至無(wú)菌離心管中，5000r/min離心5分鐘，取上清液備用（去除未反應(yīng)的噬菌體顆粒和雜質(zhì)）。

　　3：噬菌體濃度測(cè)定（噬菌斑計(jì)數(shù)法）

　　梯度稀釋：取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的上清液，用無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行10倍系列稀釋，稀釋梯度為10?、10?1、10?2、10?3、10??，每個(gè)梯度設(shè)置3個(gè)重復(fù)；

　　接種與培養(yǎng)：取每個(gè)稀釋梯度的菌液0.1mL，加入到含有0.2mL對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期大腸桿菌的試管中，輕輕混勻，37℃孵育15分鐘，使噬菌體充分吸附宿主菌；

　　倒平板：將上述混合液加入到45℃保溫的頂層瓊脂中，快速搖勻后，倒入已凝固的LB固體培養(yǎng)基平板上，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)平板，使混合液均勻鋪展，室溫下靜置10分鐘，待頂層瓊脂凝固；

　　培養(yǎng)計(jì)數(shù)：將平板倒置放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)18~24小時(shí)后，統(tǒng)計(jì)每個(gè)平板上的噬菌斑數(shù)量（選擇噬菌斑數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保結(jié)果準(zhǔn)確）。

　　4：數(shù)據(jù)計(jì)算與結(jié)果判定

　　噬菌體存活濃度（PFU/mL）計(jì)算：

　　存活濃度=平板上的噬菌斑數(shù)×稀釋倍數(shù)×10（因接種量為0.1mL）

　　示例：某稀釋梯度10?3的平板上噬菌斑數(shù)為80，則存活濃度=80×103×10=8×10?PFU/mL

　　抗病毒滅活率（R）計(jì)算：

　　R(%)=[1-（實(shí)驗(yàn)組存活濃度/對(duì)照組存活濃度）]×100%

　　注：計(jì)算時(shí)需取3個(gè)平行樣的平均值，確保數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。

　　結(jié)果判定：根據(jù)GB/T42349-2023要求，當(dāng)光催化材料的抗病毒滅活率≥90%時(shí)，判定為具備抗病毒活性；滅活率≥99%時(shí)，判定為具備高效抗病毒活性。

　　中科檢測(cè)是具備CMA、CNAS資質(zhì)認(rèn)證的抗病毒活性檢測(cè)機(jī)構(gòu)，開(kāi)展光催化材料抗病毒檢測(cè)服務(wù)，嚴(yán)格按照國(guó)標(biāo)測(cè)試方法要求，病毒包括單純皰疹病毒、帶狀皰疹病毒、冠狀病毒、流感病毒、腺病毒5型、腸道病毒、柯薩奇病毒、輪狀病毒等，出具可靠的抗病毒第三方檢測(cè)報(bào)告，具體報(bào)告費(fèi)用可以咨詢中科檢測(cè)工程師了解。